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相思子毒素-α单克隆抗体的制备与鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
用含1%甲醛的磷酸盐缓冲液对相思子毒素-a(abrin-a)减毒处理制备类毒素,以类毒素为免疫抗原分4次免疫3只BALB/c小鼠.采用聚乙二醇(PEG)法,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选分泌抗abrin-a的单克隆抗体(MeAb)杂交瘤细胞株.将阳性细胞株接种BAI.B/c小鼠制备McAb腹水,根据亚类鉴定结果,分别采用蛋白A或蛋白G亲和层析柱纯化腹水,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测McAb特异性,Western-blot法分析McAb抗原识别位点.结果获得1G5、3C2和4G1共3株McAb杂交瘤细胞株,均为抗abrin-a的特异性McAb,与相思子凝集素、蓖麻毒素(ricin)和蓖麻凝集素均无交叉反应,其中4G1为特异性结合abrin-a A链的MCAb,1G5和3C2两株为特异性结合abrin-a B链的MCAb;制备的MCAb可用于abrin-a含量的检测. 相似文献
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根据克罗诺杆菌(Cronobacter spp.)16S rRNA基因以及局部大分子合成(MMS)操纵子特异序列设计2对引物,经反应体系和条件优化,建立了双重PCR检测方法。特异性检测结果显示,Cronobacter spp.菌株PCR扩增均可见2条特异性条带,而其他菌株PCR扩增均为阴性。纯菌检测双重PCR的灵敏度为6.3×103 CFU.mL-1,而相对应单重PCR的灵敏度分别为6.3×101 CFU.mL-1和6.3×103 CFU.mL-1;人工污染的食品样品(奶粉、牛奶、鸡肉)在经过24 h增菌后,检测限均可达100 CFU.mL-1或100 CFU.g-1。在鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)存在的条件下,双重PCR的检测限没有受到影响。表明本试验建立的双重PCR检测方法具有很好的特异性和灵敏度,能克服食品样品基质及杂菌的干扰,可应用于食品中Cronobacter spp.的检测。 相似文献
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以柠檬酸三钠为还原剂,制备了20nm胶体金颗粒,以此胶体金标记纯化的单抗4G6,喷于玻璃纤维上,AFBl蛋白偶联物和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装,切割成胶体金试纸条。结果:组装的试纸条特异性好,与AF类似物无交叉反应,对AFBl标准品最低检测限为3μg/L,检测时间约为10min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。操作简便,成本很低,适于AFBl的现场快速检测。在制备了单克隆抗体的基础上,应用胶体金免疫层析技术,建立了食品中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFBl)快速检测方法。 相似文献
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以贵州美登木枝条作为材料,进行不同浓度的生长调节剂、不同扦插基质和不同扦插季节的扦插育苗试验。结果表明:扦插前用3种植物生长调节剂(NAA、IAA、IBA)对插条进行处理,均能提高贵州美登木的成活率、生根数和根长,其中以100和200 mg/L的NAA处理扦插苗成活率最高,分别达到89.2%和84.5%,比对照分别高47.4%和42.7%;在石英砂上贵州美登木扦插生根成活率和平均根数都最高,分别达87.6%和6.1条;春季是贵州美登木扦插的最适季节,扦插成活率达到89.6%。 相似文献
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非淀粉多糖酶制剂对雏鸡生长、免疫功能和肠道微生物区系的影响 总被引:12,自引:0,他引:12
2次重复试验研究了小麦米糠基础日粮添加非淀粉多糖酶制剂对雏鸡生长、免疫功能和肠道微生物区系的影响。每次试验 4 8只 7日龄鸡随机分为 2组 ,即基础日粮组、基础日粮添加 0 .1%酶组。结果表明 ,酶制剂能显著提高雏鸡增重和饲料转化率 (P<0 .0 5 ) ,使雏鸡的免疫器官相对重量增加 (P<0 .0 5 ) ,T淋巴细胞对 PHA的反应性、NK细胞活力、血清新城疫疫苗抗体效价显著提高 (P<0 .0 5 )。盲肠乳酸杆菌数略有增加 ,大肠杆菌略有下降 ,但差异不显著(P>0 .0 5 ) 相似文献
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